用途:
PT試劑用于外源性凝血途徑的篩選試驗,主要考查患者血漿中維生素K依賴性凝血因子Ⅱ(凝血酶原)、凝血因子Ⅶ和凝血因子Ⅹ,以及非維生素 K依賴性凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅰ(纖維蛋白原)的水平。
原理:
PT試劑中含有凝血活酶、磷脂、鈣離子等成分。當與血漿接觸時,血漿中的凝血因子Ⅶ立即被激活,啟動外源性凝血途徑,使血漿發生凝固。從接觸到血漿開始凝固的時間叫做血凝時間。血凝時間長短反應血漿內凝血因子水平的高低。
組成:組織凝血活酶和穩定劑
外觀:乳白色懸浮溶液;
特點:①液體型; ②高活性; ③高敏感; ④高穩定。
液體型
① 無需復溶,簡化操作程序;
② 不存在瓶間差問題;
③ 降低了操作誤差;
④ 提高了檢測精度和準確性。
高活性
高活性是指,PT試劑測定正常血漿的血凝時間較短。
實現高活性的基礎是:
①組織因子在磷脂膜上有正確取向;
②不存在或極少無效的凝血活酶和磷脂;
③鈣離子平衡達到最佳狀態。
高敏感性
高敏感是指,患者血漿PT值與正常血漿PT平均值之比接近或等于患者血漿的INR值(國際標準化比率)。
敏感度低的主要原因:
①凝血因子污染;
②有效成分破壞。
天岳的特殊生產工藝徹底消除了外來凝血因子,同時又避免了主要成分的損失。
高穩定性
PT中的主要活性成分是凝血活酶,它與磷脂微粒緊密結合,再加上二價鈣離子的作用,形成了一種剛性結構,賦予它的高度穩定特點。
國際敏感指數
目前各國在口服華法林類抗凝藥物時,已廣泛使用國際標準化比率(INR)作為控制用藥量的指標(朱忠勇,Chin J Med Lab Sci,1998,Vol 21, No.5)。
INR=PTR ISI
式中,PTR=異常PT/MNPT,MNPT=正常PT均值。 ISI值等于1時,INR=PTR。試劑的ISI無論大于1還是小于1, PT/MNPT都會偏離INR值。ISI值偏離越大, PTR與INR的差值就越大。
ISI值的測定
利用美國德靈公司(DADE BEHRING)校準的INR血漿(PT-Multi Calibrator, Code No. OPAT 035)在全自動和半自動血凝儀上測定本公司生產的PT試劑,國際敏感指數(ISI值)通常為1.0~1.3。 PT試劑的敏感性直接影響血漿INR測定結果。試劑敏感性越低,在ISI標示值不準確情況下,血漿INR測定值與實際值相差越懸殊。 臨床實踐證明,使用低ISI值的PT試劑較使用高ISI 值的PT試劑可獲得更加準確的結果(劉貴建等,臨床檢驗雜志,2004年,第22卷,第2期)。 但ISI值并非越低越好,ISI接近或等于1.0才是最理想的,因為PT試劑國際標準品的ISI=1。 此外,用PT衍生法測定血漿纖維蛋白原含量,必須用高敏感PT試劑。通常ISI值應小于1.4。因為定標時需要將血漿進行一系列稀釋,同時用PT試劑測定各個稀釋點的光密度或血凝時間。如果試劑的敏感度低,反應液的光密度或血凝時間響應就差,無法準確測定。 圖2為本公司PT試劑在HemoClot MC-1000plus血凝儀上所作的定標曲線。

PT試劑穩定性試驗 為快速考查試劑穩定性,往往進行加速變性試驗,即提高溫度或改變環境條件,有意促使試劑中的有效成分發生變化。將本公司PT試劑置于41℃存放,觀察正常質控血漿血凝時間變化情況,如果PT失活,則血凝時間延長。血凝時間越長,說明失活越嚴重(如圖所示)。

據文獻報道(US Patent 5,217,873),液體酶試劑41℃存放3天相當于4℃存放18個月。 另外,本公司開發的“抗凍PT”試劑可反覆凍融。該特點為寒冷地區的運輸提供了方便。