用途:
用于檢測血漿纖維蛋白原含量。適用于半自動、全自動血凝儀檢測或手工操作。FIB檢測常用于輔助診斷先天性和后天性纖維蛋白原缺乏(DIC、肝病等)以及監測溶栓治療。
原理:
在高濃度凝血酶(clauss法)作用下,血漿中的可溶性纖維蛋白原轉變成不溶性的纖維蛋白,從而形成血凝塊。血漿的凝血酶凝固時間和纖維蛋白原含量成反比。
組成:凝血酶、穩定劑
外觀:無色透明溶液
特點: ①液體型; ②穩定性高; ③可反復凍融;
凝血酶是存在于人和動物體內的一種蛋白酶,水溶液狀態下非常不穩定。游離狀態下,酶活保存時間如下:
37℃ 4小時;
20℃ 8小時;
2-8℃ 24小時;
-20℃可以保存1個月。
為了保存活性,通常制備成凍干品,臨用前復溶。
FIB試劑的熱變性試驗
將等體積本公司FIB試劑與市售同類產品(液體型)放入同樣大小的玻璃試管內,同時置于60℃水浴中10、20、30、40、50和60分鐘。冷卻后,分別測定同一血漿的血凝時間。結果(如圖2.所示)
FIB(clauss)定標方法
FIB(clauss)試劑含高濃度的凝血酶,測定時血漿樣本必須用咪唑緩沖液稀釋5-20倍,否則由于血凝過快而無法計時。將定標(參比)血漿(如FIB=322mg/dl)用緩沖液按1:5,1:10,1:15和1:20進行稀釋。測定各個稀釋液的血凝時間,填入下表并將結果輸入血凝儀中。
注意事項 測定血漿樣本時,以1:10稀釋作為100%進行計算,1:5稀釋應除以0.5,1:15稀釋應除以1.5,1:20稀釋應除以2.0。 血漿稀釋倍數不宜太高(最好不超過25或30倍);否則可能會導致血凝時間過長或儀器不報凝,影響定標曲線的相關性。本試劑在半自動血凝儀和全自動血凝儀上建立的定標曲線均達到滿意結果。
不稀釋血漿的FIB試劑
無需稀釋血漿,直接測定血漿樣本中纖維蛋白原含量。用該試劑直接測定FIB定值血漿的血凝時間,通過Excel作回歸處理,即可得出定標曲線,并求出方程和線性相關系數。用半自動和全自動血凝儀實測證明,該法具有廉價、簡便、快速和準確的特點。目前該試劑和方法已申請國家發明專利(200710062020.1)。

從定標曲線可以發現,該法FIB測定范圍(40mg/dl~644mg/dl)遠遠超過經典clauss法(16mg/dl~64mg/dl)。 該方法的優點在于: ①無需稀釋,直接用定標血漿建立標準曲線;②可直接在高、中、低范圍內測定FIB含量;③特別是,省去了樣本稀釋過程,避免了血漿稀釋效應和稀釋過程產生的操作誤差。 此外,由于液體凝血酶的高度穩定性,即使37℃放置一個月,FIB試劑仍可用于定標和樣本測定。圖5是用37℃放置一個月的FIB( clauss改進法,即不稀釋血漿法)試劑所作的定標曲線。